目的建立紅穿破石中大黃素含量的高效液相色譜測定方法。方法選用EclipseXDB-C18色譜柱(4.6mm×150mm,5μm),以甲醇-0.1%磷酸溶液(75∶25)為流動相,檢測波長為285nm。結果大黃素在0.0063～0.063μg范圍內呈良好的線性關系(r＝0.9999),平均回收率為102.0%,RSD＝1.58%(n＝6)。結論本法簡便,準確,可用于紅穿破石中大黃素的含量測定。
紅穿破石；大黃素；高效液相色譜法
Abstract：ObjectiveToestablishaHPLCmethodfordeterminingemodininRadixetCaulisVentilaginisleiocarpae.MethodsStationaryphasewasAgilentEclipseXDB-C18(4.6mm×150mm,5μm),mobilephasewasmethanol-0.1%phosphoric(75∶25),detectionwavelengthwas285nm,flowratewas1.0mL/minandcolumntemperaturewas30℃.ResultsTherewasgoodlinearityintherangeof0.0063～0.063μgforemodin(r＝0.9999).Theaveragerecoveryofemodinwas102.0%withRSD＝1.58%.ConclusionThismethodisrapidandaccurate.ItcanbeappliedtocontrolthequalityofRadixetCaulisVentilaginisleiocarpae.
Keywords：RadixetCaulisVentilaginisleiocarpae；emodin；HPLC
紅穿破石為鼠李科植物翼核果VentilagoleiocarpaBenth.的干燥根和老莖,主產于廣西等地[1],具有清熱利濕、利尿通淋的作用,特別是對消石具有特殊功效,民間常用于尿路感染、急慢性腎炎、腎結石的治療,現已有多個制藥廠家把它作為治療結石癥的重要組方。王氏等[2]報道,從廣西產紅穿破石根和莖中分離到大黃素、大黃素甲醚、1,2,4,8-四羥基-3-甲基蒽醌、翼核果醌-Ⅰ、翼核果素,其中大黃素為該植物的主要化學成分。有關紅穿破石的主成分含量測定尚未見報道。本試驗采用HPLC法對紅穿破石中大黃素進行含量測定,為藥材生產和質量標準提供科學依據。
1儀器與試藥
美國Agilent1100系列高效液相色譜儀(包括四元泵,自動進樣器,脫氣機,紫外可見檢測器,柱溫箱和Agilent1100化學工作站),BUG40型超聲波清洗器(上海必能信有限公司)。
大黃素對照品(批號110756-200110,含量測定用)由中國藥品生物制品檢定所提供,純度在98%以上；紅穿破石由廣西玉林制藥有限責任公司提供,來源于廣西各地,經廣西玉林制藥有限責任公司中藥鑒定室專家鑒定。水為重蒸餾水,甲醇為色譜純,其余試劑均為分析純。
2方法與結果
2.1色譜條件
AgilentEclipseXDB-C18色譜柱(4.6mm×150mm,5μm)；流動相為甲醇-0.1%磷酸溶液(75∶25)；流速：1.0mL/min；檢測波長：285nm；柱溫：30℃；進樣量：10μL。理論板數按大黃素計算應不低于3000。在此色譜條件下,紅穿破石樣品能夠達到基線分離(見圖1)。
2.2對照品溶液的制備
精密稱取大黃素對照品適量,加甲醇制成每1mL含大黃素6.3μg的溶液,作為對照品溶液。
2.3供試品溶液的制備
取紅穿破石粉末適量,取0.4g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇50mL,稱定重量,超聲30min,放冷,再稱定重量,用甲醇補足減失的重量,搖勻,濾過,濾液用微孔濾膜(0.45μm)濾過,取續濾液,作為供試品溶液。